thumb|Den kemiske struktur af Nile Blue
thumb|Model af Nile Blue
Nile blue, Nile blue A eller Nilblå er et fluorescerende farvestof, der bruges meget til farvning af snit til mikroskopi i biologi og histologi, da det kan bruges både til levende og fixerede celler for at give en blå farve til cellekernen. Farvestoffet bruges også til fluorescensmikroskopi, da det fluorescerer stærkt og reagerer med polyhydroxybutyrate-granula i prokaryote såvel som eukaryote celler.
Ved kogning af Nile blue med svovlsyre produceres Nile red (også kaldet Nile blue oxazone) der også har en stærk fluorescens.
thumb|Nile blue hydrochlorid i vand.Koncentrationer (fra venstre): 1000 ppm, 100 ppm, 10 ppm, 1 ppm, 0,1 ppm.
thumb|Nile blue i vand.Fra venstre: pH 0, pH 4, pH 7, pH 10, pH 14.
thumb|Nile blue i vand (underfasen) og i ethylacetat (overfasen) idagslys.Fra venstre: pH 0, pH 4, pH 7, pH 10, pH 14
thumb|Nile blue i vand (underfasen) og i ethylacetat (overfasen) i UV-lys (366 nm).Fra venstre: pH 0, pH 4, pH 7, pH 10, pH 14
thumb|Nile blue (fri base) i dagslys (øverst) og i UV-lys (366 nm, nederst) i forskellige opløsningsmidler. Left to right: 1. methanol, 2. ethanol, 3. methyl-tert-butylether, 4. cyclohexan, 5. n-hexan, 6. acetone, 7. tetrahydrofuran, 8. ethylacetat, 9. dimethylformamid, 10. acetonitril, 11. toluen, 12. chloroform
Kemiske og fysiske egenskaber
Nile blue er et fluorescerende farvestof. Fluorescensen viser sig særlig i upolære opløsningsmidler. Absorptionsmaxima af den absorberede elektromagnetiske stråling og emissionsmaxima af de emiterede synlige lys er stærkt afhængig af både pH og det anvendte opløsningsmiddel:
Opløsnings-middel Absorptions-maksimumλ (nm) Emissions-maksimumλ (nm) Toluen 493 574 Acetone 499 596 Dimethylformamid 504 598 Chloroform 624 647 1-Butanol 627 664 2-Propanol (Isopropanol) 627 665 Ethanol 628 667 Methanol 626 668 Vand 635 674 Saltsyre(1.0 N, pH = 1.0) 457 556 Natriumhydroxid(0,1 N, pH = 11.0) 522 668 Ammoniakvand(pH = 13.0) 524 668
Varigheden af fluorescensen i ethanol er blevet bestemt til 1.42 ns (nanosekund), hvilket er kortere end den tilsvarende værdi for Nile red på 3.65 ns. Varigheden er uafhængig af fortyndingsgraden i området 10−3–10−8 mol/L.
Biologisk forskning
Mikroskopi med Nile blue
Nile blue bruges til differentiel farvning af celler, da det farver neutrale lipider (triglycerider, cholesterolestere og steroider) pink og syrer (DNA, fedtsyrer, chromolipider og phospholipider) blå.Roche Lexikon, accessed 25 June 2007 .97/647/EG: Entscheidung der EU-Kommission vom 9. September 1997 über ein vorläufiges Versuchsprogramm für Diagnose, Nachweis und Identifizierung von Pseudomonas solanacearum (Smith) Smith in Kartoffeln, accessed 27 June 2007.
DNA-electrophorese
Nile blue bruges også som farvning af DNA i DNA-elektroforese.
Farvning af celler
Se også
Fluorofor Lysstof eller fosfor (med tryk på sidste stavelse)
Eksterne henvisninger og referencer
Fluorescens. Biosite
Kategori:Fysik Kategori:Lys Kategori:Biokemi Kategori:Biologi Kategori:Farvestoffer