Dose létale médiane

La dose létale médiane (DL), ou concentration létale médiane (CL), est un indicateur quantitatif de la toxicité d'une substance. Cette notion s'applique également aux irradiations.

Cet indicateur mesure la dose de substance causant la mort de 50 % d'une population animale donnée (souvent des souris ou des rats) dans des conditions d'expérimentation précises. C'est la masse de substance nécessaire pour tuer 50 % des animaux dans un lot. Elle s'exprime en milligrammes de matière active par kilogramme d'animal.

Quant à elle, la DL est la dose létale engendrant la mort de 100 % des individus d'une population animale donnée.

Plus ce chiffre est petit, plus la substance est toxique. Cette dose n'est valable que pour une espèce précise (le plus souvent le rat) et un mode d'introduction précis dans l'organisme (ingestion, inhalation, application cutanée). Notons toutefois que la DL peut varier, parfois fortement, en fonction du solvant utilisé ainsi qu'en fonction du sexe de l'animal. Ces chiffres ne sont pas directement extrapolables à l'humain.

La DL est le plus souvent exprimée pour une ingestion orale chez le rat. La DL mesurée par application dermale chez le lapin donne une information complémentaire sur le danger d'une substance. La valeur par ingestion est le plus souvent plus faible que la valeur dermale.

Ces mesures ne donnent toutefois qu'une idée partielle de la toxicité d'une substance, à laquelle il faut rattacher l'existence ou non d'un antidote. Ainsi, le parathion éthyl, malgré une DL orale aiguë de , est relativement moins dangereux que le paraquat (DL de ) car il existe un antidote efficace contre le premier mais aucun contre le second. Il est commun d'affirmer que les pesticides ayant une DL orale inférieure à constituent des substances chimiques extrêmement toxiques pour l'humain.

Pourquoi 50 % ?

Dans la mesure où une dose toxique ne peut pas être négative, l'effet d'une dose est mathématiquement décrit comme une fonction non pas de la dose elle-même, mais du logarithme de cette dose : en tout point il est alors possible d'explorer les effets d'une dose « deux fois plus forte » ou « trois fois plus faible », sans que l'intervalle d'étude soit écrasé ou dispersé par un facteur d'échelle. D'une manière générale, la résistance à la toxicité dépend a priori d'un grand nombre de facteurs aléatoires ou indépendants, qui concourent multiplicativement à un effet global. Dans ce cas, des variations dans la résistance d'un organisme se manifestent par des variations dans le pourcentage de dose admissible, les pourcentages de variation autour de la valeur moyenne se composant multiplicativement. Et le théorème central limite signifie alors que la superposition de ces petits effets aléatoires tend à être une loi de Gauss, ce qui se traduit par une loi log-normale dans ces coordonnées logarithmiques.

On peut donc s'attendre à rencontrer une telle loi log-normale gouvernant de très nombreux phénomènes biologiques. Dans ce cas, la courbe expérimentale de la fonction de répartition (le pourcentage de sujets présentant l'effet en fonction de la dose) tend à suivre une fonction de répartition régulière, qui apparaît comme une droite dans un diagramme de Weibull. Pour l'expérimentateur, le fait que ses points expérimentaux s'alignent dans un tel diagramme signifie que pour l'intervalle de dose étudié, la réponse des organismes est homogène ; et cette réponse peut être décrite de manière simple par la « droite expérimentale ».

Le fait que le résultat de l'expérience puisse être bien décrit par une droite est important. Sur le plan pratique, il signifie que l'expérimentateur peut prédire avec une approximation suffisante le résultat attendu pour une dose interpolée ou extrapolée par rapport à ses données d'expérience. D'autre part, à partir du moment où l'on suppose que la loi est réellement log-normale, la droite constituant la meilleure approximation permet dans une grande mesure de lisser les résultats expérimentaux. Mais sur le plan théorique, surtout, le fait d'avoir trouvé une droite signifie que la loi log-normale capture effectivement l'essence du phénomène, c'est-à-dire qu'un grand nombre de facteurs individuels aléatoires et indépendants font varier chacun d'un certain pourcentage la dose maximale admissible ; ce fonctionnement métabolique complexe étant de nature homogène dans l'intervalle où les points sont alignés. En dehors de cet intervalle, si le mécanisme prédominant n'est plus le même, l'alignement ne sera plus respecté : il y aura une rupture de pente, ou la distribution peut cesser complètement d'être log-normale. Dès que la droite n'est plus droite, le phénomène n'est plus le même .

Dans l'intervalle où la droite expérimentale est une approximation satisfaisante, il est possible de caractériser cette droite par deux paramètres : sa pente, et son point sur une origine conventionnelle. S'agissant de l'origine, c'est pour des raisons de représentativité statistique qu'on utilise la valeur 50 %, plutôt que 0 %, 5 %, 95 %, ou 100 %. En effet, la courbe de Gauss est « plate » vers 50 %, ce qui fait qu'un échantillon est plus représentatif lorsqu'un seuil est franchi à 50 %, parce que c'est autour de cette valeur que l'incertitude sur les pourcentages observés est la plus faible, donc que la valeur mesurée est la plus fiable.

Inversement, la pente de la courbe n'est généralement pas mentionnée. La pente correspond à la sensibilité aux variations par rapport à la DL : si je double cette dose, la mortalité sera-t-elle plutôt de 55 % (pente faible) ou plutôt de 95 % (pente forte)? Le problème est que cette pente est fortement déterminée par les points expérimentaux extrêmes, ceux correspondant à quelques pour cent de victimes pour les valeurs faibles, et quelques pour cent de survie pour les valeurs fortes. Mais ces points expérimentaux sont précisément ceux pour lesquels l'incertitude est la plus forte ; par conséquent l'incertitude sur la pente de la droite est beaucoup plus grande que celle sur la valeur médiane. La valeur obtenue n'est généralement pas très fiable.

En outre, cette valeur est généralement sans importance : connaissant la DL, on ne cherche pas à savoir quelle est la variation d'effet en fonction de la dose, mais quelles sont les limites admissibles. Sauf cas très particulier, la pente de la courbe n'est ni très raide, ni très plate ; et qualitativement cela suffit pour savoir que dix fois la DL conduira à la mort de pratiquement tous les sujets d'expérience, alors qu'un pour cent de cette DL sera très probablement sans effets observables. C'est cet écart par rapport à la DL qui permet par exemple de calculer l'index thérapeutique.

Historique Le concept de dose létale 50 a été inventé par J.W. Trevan en 1927 et permet de classifier tous les produits par dangerosité à court et moyen termes.

L'OCDE a fait de la DL un test officiel (ligne directrice pour les ) en 1981. En 1987, elle a réduit à vingt au lieu de trente le nombre minimal d'animaux que doit contenir l'échantillon testé. En 2001, elle a approuvé trois nouvelles méthodesExpérimentation animale.

Les trois nouvelles méthodes de test sont : méthode de la dose prédéterminée ; méthode par classe de toxicité aiguë ; méthode de l’ajustement des doses., destinées à remplacer la DL et à occasionner une moindre souffrance animalehttp://www.unece.org/trans/doc/2002/ac10c3/ST-SG-AC10-C3-2002-23f.pdf.

Le , la ligne a finalement été abrogée par l'OCDEOECD Test Guideline 401 will be deleted: A Major Step in Animal Welfare: OECD Reaches Agreement on the Abolishment of the LD50 Acute Toxicity Test..

Interprétation La DL s'exprime en unité de masse de substance par masse corporelle, c’est-à-dire en .

Exemple : une quantité de d'un produit toxique ayant une DL de provoquerait théoriquement la mort de la moitié des humains pesant .

La DL permet de mesurer la toxicité d'une substance et d'établir des classes de toxicité.

+ Classes de toxicité : échelle de Gosselin, Smith et Hodge Dose orale probablement mortelle (humain) Classe de toxicitéMoins de 5 mg/kgSuper toxiqueDe 5 à 50 mg/kgExtrêmement toxiqueDe 50 à 500 mg/kgTrès toxiqueDe 500 à Modérément toxiqueDe Légèrement toxiquePlus de Très peu toxique+ Classes de toxicité : échelle de Hodge et Sterner DL orale (rat) Indice de toxicitéJusqu'à 1 mg/kg1 = extrêmement toxiqueDe 1 à 50 mg/kg2 = hautement toxiqueDe 50 à 500 mg/kg3 = modérément toxiqueDe 500 à 4 = légèrement toxiqueDe 5 = presque pas toxiquePlus de 6 = relativement inoffensif

En général, plus la DL est petite, plus la substance est toxique. Le contraire est également vrai : plus la DL est élevée, plus la toxicité est faible.

Voici, à titre indicatif, la DL de produits communs (testée sur le rat par voie orale) : eau : la DL de l'eau pour un rat est de . ; vitamine C : ; bisphénol A : MSDS Bisphénol A , Sigma-Aldrich, 2004. ; sel de table : ; glyphosate : supérieure à , ou .; tétrahydrocannabinol (THC) : de 700 à .. ; caféine : 192 mg/kg ; nicotine : 50 mg/kg ; digitaline : de 5 à 10 mg/kg ; strychnine : 1 mg/kg ; cyanure : de 0,5 à 3,0 mg/kg ; dioxine : 0,02 mg/kg (0,001 mg/kg pour le chien) ; toxine botulique : .

Échelle des poisons

La fourchette de valeurs DL50 est très grande. La toxine botulique, en tant que substance la plus toxique connue, a une valeur DL50 de , tandis que la substance la moins toxique, l'eau, a une valeur DL50 de plus de . C'est une différence d'environ un sur cent milliards, soit onze ordres de grandeur. Comme pour toutes les valeurs mesurées qui diffèrent de plusieurs ordres de grandeur, une représentation logarithmique est conseillée. Des exemples bien connus sont l'indication de la force du tremblement de terre à l'aide de l'échelle de Richter, la valeur du pH comme mesure du caractère acide ou basique d'une solution aqueuse ou de l'intensité sonore en décibels. Dans ce cas, on considère le logarithme décimal négatif des valeurs de DL50, qui est normalisé en de poids corporel : () = valeur. La valeur sans dimension trouvée peut être entrée dans une échelle de toxines. L'eau, en tant que substance la plus importante, a la valeur de 1 dans l'échelle des toxines ainsi obtenue.

DL et radio-exposition L'exposition à un flux de rayonnements ionisants à dose importante provoque un effet toxique. Une dose de 4 Gray sur un adulte correspond à la DL.

Méthode On administre généralement la substance toxique à des animaux répartis en plusieurs groupes, et ce, à des doses croissantes suffisantes pour obtenir un pourcentage de mortalité s'échelonnant entre 0 et 100 %.

L'effet d'une substance est globalement inversement proportionnel à la masse de l'animal à qui elle est administrée, c'est pourquoi la dose létale 50 est mesurée en .

En général, si la toxicité immédiate est semblable chez tous les types d'animaux, elle sera probablement semblable chez les humains. Lorsque les DL sont différentes chez diverses espèces animales, on doit faire des approximations et des hypothèses lors de l'estimation de la dose mortelle probable chez les humains.

Utilisation Identification de la toxicité Elle sert à mesurer toute la toxicité d'une substance, mesures qui s'effectuent via des études qualitatives (non mesurables) et quantitatives (mesurables dont la DL).

La DL sert souvent de départ aux études de toxicité car elle fournit un minimum de connaissances en identifiant les symptômes de l'intoxication et la dose toxique.