Mathilde, née vers 1251 à Rheinfelden et décédée le à Munich, est une princesse de la maison de Habsbourg, fille du roi et de Gertrude de Hohenberg. Épouse de , elle est duchesse de Haute-Bavière et comtesse palatine du Rhin de 1273 à 1294.
Biographie Mathilde naît à Rheinfelden en Souabe, la fille aînée de Rodolphe de Habsbourg et de sa première épouse Gertrude de Hohenberg. Au moment de sa naissance, pendant le Grand Interrègne, la maison de Habsbourg n'a pas une grande importance ; cela change le , lorsque son père est élu roi des Romains.
Parmi ses frères figurent notamment , qui succède à leur père en 1298, et .
Afin d'assurer son élection, Rodolphe de Habsbourg pratique une politique de mariages : il offre la main de sa fille Mathilde au duc , comte palatin du Rhin issu de la maison de Wittelsbach, l'un des princes-électeurs et vicaire impérial. Le , Mathilde de Habsbourg épouse donc à Aix-la-Chapelle. Le même jour, sa sœur cadette Agnès se marie avec le duc et prince-électeur . D'autres mariages de ses sœurs suivent peu après : Catherine et , Hedwige et , Clémence et Charles d'Anjou, roi titulaire de Hongrie, ainsi que Judith et le roi .
Mathilde est la troisième femme de . Cinq enfants sont issus de cette union : (1274–1319) ; Mathilde de Bavière (1275–1319) qui en 1288 épouse le duc ; (1276–1340), qui en 1290 épouse le landgrave Henri de Hesse, veuve elle épouse en 1298 le margrave ; Anne (née en 1280), qui entre dans les ordres à Ulm ; (1282–1347), futur empereur du Saint-Empire.
Lors de son mariage, Mathilde reçoit la ville de Neustadt an der Weinstraße dans le Palatinat rhénan ; en tant que comtesse palatine, elle dispose de sa propre cour. Néanmoins, la mort de en 1291 et l'élection du comte Adolphe de Nassau au roi des Romains approfondissent les divergences d'intérêt entre les maisons de Habsbourg et de Wittelsbach. Juste avant son décès en 1294, son mari arrange le mariage de leur fils Rodolphe et de Mathilde de Nassau.
Après le décès de , le , Mathilde tente à plusieurs reprises de servir d'intermédiaire entre son frère Albert et Adolphe de Nassau qui a l'appui de son fils Rodolphe. Elle échange son douaire dans le Palatinat rhénan contre d'autres domaines en Haute-Bavière. De plus, le patrimoine des Wittelsbach fait l'objet de divergences entre Rodolphe et son frère cadet . Mathilde apporte son soutien aux prétentions de Louis et est donc temporairement emprisonnée par Rodolphe.
Relâchée, elle est décédée le à Munich. Elle est enterrée dans l'abbaye de Fürstenfeld, aux côtés de son mari.
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