12-O-Тетрадеканоилфорбол-13-ацетат (ТФА), также известный как форбол-12-миристат-13-ацетат (ФМА) или тетрадеканоилфорбол ацетат (ТФА) — органическое соединение, сложный эфир форбола и карбоновых кислот, относящееся к группе форболовых эфиров. Является мощным промотором опухолей и широко используется в биомедицинских исследованиях для активации протеинкиназы C (PKC).
Физические и химические свойства ТФА представляет собой твёрдое вещество с температурой плавления 50-70 °C. Практически нерастворим в воде. Молекулярная формула — C36H56O8, молекулярная масса — 616,83 г/моль.
Механизм действия Действие ТФА основано на его структурном сходстве с одним из естественных активаторов классических изоформ протеинкиназы C — диацилглицерином. Связываясь с PKC, ТФА активирует сигнальные пути, что приводит к разнообразным клеточным эффектам, включая пролиферацию, дифференцировку и изменение экспрессии генов.
В биологии активных форм кислорода (АФК) ТФА/ФМА используется как индуктор эндогенной продукции супероксида в макрофагах.
ТФА вызывает реактивацию вируса саркомы Капоши, ассоциированного с герпесом (KSHV), в культурах PEL-клеток через стимуляцию сигнального пути MAPK/ERK, что приводит к активации раннего вирусного белка RTA и запуску литического цикла.
Применение в научных исследованиях
Активация протеинкиназы C ТФА является классическим инструментом для изучения сигнальных путей, опосредованных протеинкиназой C. Его используют для:
Исследования роли PKC в клеточной пролиферации, дифференцировке и апоптозе. Изучения механизмов канцерогенеза и опухолевой прогрессии. В качестве положительного контроля в экспериментах по активации клеток.
Цитогенетические исследования ТФА применяется в цитогенетических тестах как митоген для стимуляции деления B-лимфоцитов, что необходимо для визуализации хромосом при диагностике B-клеточных злокачественных новообразований, таких как хронический лимфолейкоз.
Стимуляция иммунных клеток Совместно с иономицином ТФА часто используется для стимуляции активации и пролиферации T-клеток, а также продукции цитокинов. Применяется в протоколах внутриклеточного окрашивания цитокинов.
ELISPOT В ELISPOT-анализе форболовые эфиры, такие как ТФА, используются в качестве положительного контроля для подтверждения жизнеспособности клеток и их способности секретировать цитокины.
Источники и токсикология ТФА впервые был выделен из растения рода кротон (Croton tiglium), произрастающего в Юго-Восточной Азии. Контакт с этим растением вызывает раздражение кожи, подобное ядовитому плющу. Растения с высоким содержанием форболовых эфиров представляют проблему как корм для травоядных животных в животноводстве.
ТФА классифицируется как канцероген (промотор опухолей). Согласно данным Sigma-Aldrich, вещество обладает острой токсичностью при пероральном, накожном и ингаляционном воздействии (H300+H310+H330), вызывает серьёзные ожоги кожи и повреждение глаз (H314), может вызывать аллергические кожные реакции (H317), при вдыхании может вызывать аллергию или астматические симптомы (H334), а также подозревается в канцерогенности (H351).
Клинические исследования ТФА изучался как потенциальный препарат для лечения гематологических злокачественных новообразований. Проведена фаза I клинического исследования с участием пациентов с рецидивирующими/рефрактерными формами рака.
Примечания
Литература
Ссылки
Tetradecanoylphorbol acetate — NCI Dictionary of Cancer Terms Phase 1 Clinical Trial — ClinicalTrials.gov
Категория:Сложные эфиры Категория:Дитерпены Категория:Циклопропаны Категория:Циклоалкены Категория:Ацетаты (эфиры) Категория:Канцерогены